マウス体内の血液で触媒を作り、がんに運んで化学治療 体内創薬化学研究所確立への第一歩に

東京工業大学 物質理工学院 応用化学系の田中克典教授（理化学研究所（理研）開拓研究本部 田中生体機能合成化学研究室 主任研究員）、今井恭祐大学院生（博士後期課程1年）、チャン・ツンチェ特任助教（研究当時、現 理研研究員）、同 科学技術創成研究院の六車共平助教（理研基礎科学特別研究員（研究当時））らの研究チームは、マウスに遷移金属触媒^[用語1]や試薬を順に静脈投与することによって、（1）血液中のタンパク質（アルブミン）から遷移金属触媒複合体（人工金属酵素）を体内で作り、その触媒活性を利用して（2）がんに人工金属酵素を送り込むとともに、（3）抗がん活性分子を生体内合成し、副作用を抑えたがん治療を行うことに成功しました。

本研究成果は、金属触媒反応によって、マウスの静脈中に元々存在するタンパク質を原料として人工金属酵素を合成し、さらにその人工金属酵素による二度の金属触媒反応をがん治療に利用した世界初の例であり、生体内のタンパク質、さらには体内のあらゆる物質を原料とするがんの化学療法の開発に大きな貢献をもたらすと期待できます。今回の生体内での二度の金属触媒反応を巧みに利用する治療法は非常に革新的であり、この成果によって、田中教授らの目指す、体内の現地で、体内の分子を有効に利用しながら薬剤や生物活性分子を直接合成して治療を行う生体内合成化学治療^[用語2]を用いた、「体内創薬化学研究所^[用語2]」の確立に大きく近づきました。

がんの化学療法においては正常組織への副作用が長年の課題です。その解決策の一つとして、遷移金属触媒を使ってがんのある場所でさまざまな抗がん活性物質を合成し、がんを治療する生体内合成化学治療が田中教授らを中心に世界中で研究されています。しかし、これまでは反応容器内で合成・精製した人工金属酵素を体内に投与するのが一般的でした。

今回、研究チームは、遷移金属触媒とcRGD（環状アルギニンーグリシンーアスパラギン酸）ペプチド^[用語3]を静脈投与することで、血液中に存在するアルブミンから、人工金属酵素を作りました。この人工金属酵素は、自らの金属触媒活性で表面に搭載したcRGDペプチドの効果によりがんに選択的に移行するとともに、がんでもう一度金属触媒活性を発揮して抗がん活性分子を合成し、副作用なくがんを治療することができました。

本研究は、科学雑誌『Angewandte Chemie International Edition』オンライン版（7月11日付）に掲載されました。

抗がん剤はがんを治療することができますが、その毒性から正常細胞にも影響を及ぼしてしまうため副作用が大きな問題になります。正常細胞への影響を減らす方法として、毒性を持たない前駆体（プロドラッグ）をがん細胞だけで毒性を発揮する抗がん剤へと変換する方法が盛んに研究されています。

田中教授らは、金やルテニウム（Ru）などの遷移金属触媒の反応を体内で活用した生体内合成化学治療を開発し、副作用のないがん治療において世界をリードしてきました。通常、遷移金属触媒は生体内では触媒毒によってすぐに活性を失ってしまいますが、アルブミンの疎水性ポケットに遷移金属触媒を導入することによって触媒が保護され、薬剤を体内で合成することができます^※1-3。しかし、これまでの研究では、あらかじめ反応容器で合成・精製した遷移金属触媒複合体（人工金属酵素）を体内に投与して治療を行ってきました。

そこで本研究では、アルブミンを「体内で有効利用できる人工金属酵素の原料」として用いることを計画しました。生体内で人工金属酵素を合成するとともに、この金属触媒活性を有効に利用して、人工金属酵素を体内のがん部位に運びます。さらにがん部位で抗がん活性分子を合成して、そのままがんを治療するという、生体内での二度の金属触媒反応を有効に利用した革新的な治療技術を検討しました。

研究チームは、血液に、アルブミンの疎水性リガンドを持つルテニウム触媒、ならびにベンジルフルオライド構造^[用語4]を持つ蛍光分子を加えると、まず血液中のアルブミンの疎水性ポケットにルテニウム触媒が配位し、次にルテニウム触媒によってベンジルフルオライド蛍光分子が活性化されることで、アルブミンが選択的に蛍光標識されることを見いだしました（図1）。

マウスの血液にルテニウム（Ru）触媒とベンジルフルオライド構造を持つ蛍光分子を加えると、ルテニウム触媒の疎水性リガンドの効果で、ルテニウム触媒が血液中のアルブミンに配位する。するとルテニウム触媒が触媒反応によって蛍光分子を活性化させる。その活性種がアルブミンと反応し、アルブミンが選択的に蛍光標識される。

この結果から、ベンジルフルオライド蛍光分子の代わりに、体内でがん組織に移行する性質を持つcRGDペプチドを持つベンジルフルオライドを加えることで、人工金属酵素の表面にcRGDペプチドを導入でき、体内で選択的にがんに移行する人工金属酵素を作ることができると考えました。さらに、人工金属酵素はがんに選択的に移行した後でも触媒活性を維持し、そこに抗がん活性ペプチドを持つベンジルフルオライド^※4を体内に投与することで、二度目の金属触媒反応によってがんに抗がん活性分子を接着させ、副作用を抑えたがん治療を実現できると予測しました（図2A）。

そこで、ヒト結腸腺がん細胞（SW620）を移植したゼノグラフトモデルマウス^[用語5]を用いた治療実験を行いました。まず、ルテニウム触媒とcRGDペプチドを持つベンジルフルオライドをゼノグラフトモデルマウスに静脈投与しました。1時間後に抗がん活性ペプチドを持つベンジルフルオライドを静脈投与したところ、顕著ながんの増殖抑制効果が見られました（図2B）。一方で三つの試薬のうち、1種類もしくは2種類、あるいは溶媒のみを投与した条件（ビークル）では、治療効果は全く認められませんでした。

以上の結果から、マウスの血液中に豊富に存在するアルブミンを有効利用して、（1）体内で直接人工金属酵素を合成するとともに、その金属触媒活性によって、（2）がんに人工金属酵素を運び、（3）がんを副作用なく治療できることが分かりました。

※4

たった1回の投薬で効く体内触媒戦法｜東工大ニュース（2021年9月2日プレスリリース）

（A）生体内合成化学治療の手順。ルテニウム触媒とcRGDペプチドを持つベンジルフルオライドを、SW620がんを移植したマウスに静脈投与し、体内で人工金属酵素を合成した。がんに移行した人工金属酵素によって、追加で投与した抗がん活性ペプチドを持つベンジルフルオライドががんに接着され、毒性を発揮する。
（B）マウスに試薬を投与した後の腫瘍の体積の変化。三つの試薬を全て投与した条件（赤）だけで腫瘍の増殖が抑制された。

本研究成果は、生体内での二度の金属触媒反応を巧みに利用することで、マウスの静脈中に存在するタンパク質を原料として人工金属酵素を合成し、がんの治療に応用した世界で初めての例です。今回使用したルテニウム触媒だけでなく、多種多様な遷移金属触媒を含む人工金属酵素を血中で作り、そのまま体内でさまざまな治療分子を「現地」で合成して治療することが期待できます。この研究成果は、生体内のタンパク質を原料とするがんの革新的な生体内合成化学治療の開発、ひいては体内創薬化学研究所確立への大きな第一歩につながるものです。