たった1回の投薬で効く体内触媒戦法 細胞毒性ペプチドを金属触媒でがん細胞に貼り付ける

東京工業大学物質理工学院応用化学系の田中克典教授（理化学研究所開拓研究本部田中生体機能合成化学研究室 主任研究員）、六車共平研究員（日本学術振興会 特別研究員）、理化学研究所開拓研究本部田中生体機能合成化学研究室のペニー・アーマディ特別研究員（研究当時）らの共同研究グループ^※は、遷移金属触媒^[用語1]を用いて、マウス体内のがん細胞表面に「細胞毒性ペプチド」を貼り付けることにより、腫瘍の成長を抑制し延命させることに成功しました。

本研究成果は、細胞毒性ペプチドと遷移金属触媒を静脈からたった1回注射投与するだけでがんを治療するという、前例のない効果的な生体内合成化学治療^[用語2]であり、今後の創薬や医療に大きな影響を与えるものと期待できます。

　がんの化学療法では、薬物の血中濃度を維持したり、がん細胞に対するダメージを蓄積させたりするために、抗がん剤を反復投与する必要があるのが課題でした。

今回、共同研究グループは、そのままでは無毒でありながら、細胞表面に貼り付けると細胞毒性を示す6アミノ酸残基からなるペプチド（Ac-Gly-Gly-Lys-Leu-Phe-Gly）を発見しました。このペプチドにベンジルフルオライド構造を導入したものと、遷移金属（ルテニウム）触媒複合体とをマウスに静注すると、体内で、反応性の高い中間体が生成されます。遷移金属触媒複合体は、がん組織に選択的に送達されるように設計されているため、ペプチドは効率よくがん細胞へ貼り付き（共有結合を形成）、抗がん作用が発揮されます。ペプチドと遷移金属触媒をマウスに1回投与するだけでがん細胞の増殖が抑制され、副作用も見られませんでした。

本研究は、科学雑誌『Chemical Science』のオンライン版（9月2日付）に掲載されました。

がんの化学療法は、細胞に対して毒性を示す薬剤（抗がん剤）を投与し、がん組織にダメージを与えることで、がん（悪性腫瘍）の縮小を目指す治療法です。しかし、抗がん剤はがん細胞だけでなく正常細胞にも影響を及ぼすことから、さまざまな副作用が現れるという問題があります。正常細胞への影響を減らし、副作用を最小限に抑える手法として、抗がん剤を選択的にがん組織に送達する（薬物送達）、もしくは毒性を持たない化合物（プロドラッグ^[用語3]）をがん組織において毒性を示す化合物へと変換する方法などがあります。

これまでに田中克典教授らは、体内遷移金属触媒反応を利用しプロドラッグの活性化法を開発してきました。通常、遷移金属触媒を生体に投与すると、グルタチオンなどの触媒毒^[用語4]によってその機能は失われます。しかし、血清アルブミンタンパク質の疎水性ポケットの中へ遷移金属触媒を導入すると、遷移金属触媒が安定化され、生体内においても効率的に触媒反応が進行することを2019年に見いだしました^※1。この技術に基づいた体内遷移金属触媒反応により、2021年にはがん細胞に抗がん活性物質を貼り付ける（タギングする）ことで、副作用なく、がん細胞の増殖やがんの転移を抑制することに成功しました^※2。しかしこの治療では、効果が発揮されるまで複数回の薬物投与が必要という課題がありました。

※1） 2019年7月2日プレスリリース 触媒的「現地合成」によるがん治療｜理化学研究所

※2） 2021年4月24日プレスリリース 世界初のマウス体内におけるタギング治療｜東工大ニュース

がん細胞に治療薬を貼り付けて治療する戦略では、治療薬の選択が重要です。共同研究グループはまず、遷移金属触媒を用いたがん細胞表面への貼り付け反応によって抗がん活性を示す化合物を探索しました。その結果、そのままでは無毒性（測定範囲内）ですが細胞表面に貼り付けると毒性を示す「細胞毒性ペプチド」を発見しました。この性質には、貼り付けることで、細胞表面のペプチド濃度が高まることが影響していると考えられます。

このとき用いた遷移金属触媒は、がんに集積する性質を持つRGDペプチド^[用語5]で修飾したアルブミンタンパク質と複合体を形成します。そのため、生体に投与するとがん組織へ選択的に送達され、細胞毒性ペプチドを貼り付けることができます。

次に、細胞表面への貼り付け効率の良い反応を利用すれば治療効果を高められると考え、ルテニウム（Ru）触媒を用いた新しい反応を開発しました（図1）。この反応では、細胞毒性ペプチドに導入したベンジルフルオライド構造とルテニウム触媒によって反応性の高い中間体が生成され、がん細胞表面にペプチドを貼り付けることができます。これまで用いてきた金（Au）触媒による反応と比較しても、約20倍も効率的に進行します。

ペプチドとルテニウム触媒によるがん細胞に対する毒性を、SW620細胞（ヒト結腸がん細胞）を用いて評価したところ、ペプチド（使用した濃度：600 μmol/L）や触媒（使用した濃度：20 μmol/L）をそれぞれ単独で作用させた場合は細胞毒性を示さないのに対して、ペプチドと触媒の両方を作用させると毒性を示すことが分かりました（図1）。

細胞毒性ペプチドにはベンジルフルオライド構造が導入されており、ルテニウム触媒によって反応性の高い中間体が生成されるため、がん細胞表面にペプチドを効率的に貼り付けることができる。左下のグラフは、SW620細胞（ヒト結腸がん細胞）での毒性試験の結果。触媒のみ（橙）およびペプチドのみ（灰色）の場合は毒性を示さなかった一方、触媒とペプチドで共処理する（橙＋灰色）と有意な細胞毒性を示した（コントロールに対してp<0.001）。

最後に、マウス個体における体内金属触媒反応による細胞毒性ペプチドの治療効果を評価しました。SW620細胞を移植した担がんマウス^[用語6]を4群に分け、各マウスに （1）生理食塩水、（2）触媒のみ、（3）ペプチドのみ、（4）触媒とペプチドの両方をそれぞれ静脈内に1回注射投与し、腫瘍の成長を比較しました。その結果、（1）～（3）のマウス群では腫瘍の成長が抑制されず、25日前後で死亡したのに対し、（4）のマウス群では、腫瘍の成長が抑えられ、生存期間が2倍近く延長することが分かりました（図2）。また、副作用は見られませんでした。

写真中の矢印（白）ががん部位を示す。生理食塩水を投与した対照群（グラフ：青、写真左, n = 8）では、腫瘍が増大し、20日を過ぎた頃には生存率が0%になった。触媒のみ（グラフ：橙, n = 8）やペプチドのみ（グラフ：灰色, n = 8）を投与した場合においても治療効果は見られなかった。一方、ペプチドと触媒を共に投与したマウス（グラフ：紫、写真右, n = 4）では、腫瘍の成長が抑制され、マウスの生存期間も50日まで延長した。対照群に対して、*p < 0.05, *p < 0.01, ****p < 0.001。

本研究では、独自に見いだした細胞毒性ペプチドを体内金属触媒反応によりマウスにおいて、がん細胞に貼り付けることで、副作用なくがんを治療することに成功しました。これまでの生体内合成化学治療では、投与回数を減らすことができませんでしたが、ルテニウム触媒により、静脈からたった1回の投与で腫瘍の成長を抑えるという、これまでにない効果的な生体内合成化学治療が実現しました。

本成果により、これまでの研究室レベルの小さなスケールの研究からより現実的ながん治療へと発展することが可能になりました。今後、生体内合成化学治療の概念ががん治療における有用な治療基盤の一つとして発展するものと期待できます。